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- 松材线虫分离方法，教你如何快速分离松材线虫
来源： 更新时间：2021-08-19 阅览3329次
- 松材线虫是一种毁灭性虫害，被松材线虫感染后的松树，针叶出现黄褐色或红褐色，会出现萎蔫下垂的现象，树脂分泌停止，会整株枯萎死亡、最终腐烂。因为松材线虫危害大，所以要加强检疫与防治。分离检验是常用的检疫检验方法，主要的分离方式有漏斗法分离、浅盘法分离，还可通过线虫分离器快速分离。下面，我们就来详细地了解下这些方法。
1、贝尔曼漏斗法：
（1）、置备一只直径10-15cm的玻璃漏斗，玻璃漏斗末端接上一段长约15㎝的乳胶管，置于漏斗架上，在乳胶管上装一个止水夹。
（2）、对媒介昆虫进行线虫分离时，可用剪刀将其剪碎或用箭头镊子、解剖针将其撕碎，剪取大小合适的2层纱布将碎体包裹后，放入漏斗中，关闭漏斗下端乳胶管上的止水夹，然后从漏斗壁慢慢注入清水，使清水充满漏斗和下面乳胶管，水要漫过纱布包。
（3）、浸泡24小时后，将培养皿置于乳胶管下，打开止水夹，接取15ml浸泡液，供镜检或作为样品送检。
2、浅盘法：
（1）、前盘分离装置由2个口径不同的用不锈钢或铝合金等材料制成的浅盘组成，将其中口径。略小，底部为粗网筛的浅盘放在另一个浅盘上面。
（2）、将大小合适的2层少补平铺于筛盘上，松木样品细木条（或木片、木屑）置于筛盘纱布上面，慢慢注入清水，使清水浸泡全部样品。
（3）、浸泡24小时后，移去筛盘，把大浅盘内的样品浸泡液倒入烧杯中，烧杯内浸泡液中的线虫可通过自然沉降或离心方法，移去多余的水分，浓缩至适宜的量，以便显微镜检验。
3、线虫分离器：
（1）、将采集的植株根部的样品轻轻的洗去其表面所附的土壤。
（2）、将潮湿的根剪成1-2cm的小段放入筛网（筛网底部可衬一块垫巾或纱布）。
（3）、把内置样品的筛网放在接虫皿上，然后打开线虫分离器的箱盖，把接虫皿及筛网均匀的排列在箱体内（两层之间用筛网支架隔开），盖上箱盖。
（4）、把波纹管带盖的一端装在箱盖入雾口，另一端插入雾化器的喷雾口。
（5）、用定时器设定通电雾化的时间（设定方法请仔细阅读定时器说明书），把设置好的定时器插在220V~50Hz电源上（此时定时器进入计时状态），雾化器插头插在定时器插孔中。
（6）、顺时针旋转雾化器的旋钮开关，电源指示灯亮，证明已接通电源，雾化器开始工作，可根据需要旋转开关旋钮调节雾量大小。
（7）、12-24小时（根据样品种类来确定具体分离时间）后，关闭雾化器电源，打开箱盖，先把筛网拿起，取出接虫皿，放在双筒解剖镜或高倍显微镜下检查有无线虫及鉴定线虫种类。
线虫分离器与浅盘法、漏斗法分离相比，相同点利用的都是线虫喜水的特性，不同的点在于线虫分离器利用的是水雾，耗水量低，雾气还能够提供充足的氧气，保证分离出来的线虫多数是获得，而且分离得到的线虫很干净，可直接用于检验。
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